IL-12介紹

1989年，白細胞介素-12（IL-12）從EB病毒轉(zhuǎn)化的B淋巴細胞上清液中被鑒定出來，當加入人外周血淋巴細胞時，因其能誘導干擾素（IFN）-γ和自然殺傷（NK）介導的細胞毒性而被命名為“自然殺傷刺激因子"。這種促炎癥的異源二聚體細胞因子由共價連接的p40和p35亞基組成，是IL-12細胞因子家族中的一員，該家族還包括IL-23、IL-27、IL-35和IL-39等因子。IL-12和IL-23都是復合型細胞因子，有一個共同的IL-12 p40亞基并共用IL-12Rβ1受體，而其因子特異性則主要由IL-12 p35亞基以及IL-23p19亞基分別與IL-12Rβ2受體以及IL-23R受體結(jié)合而得到區(qū)分。p35和p40基因都需要在同一個細胞內(nèi)表達并形成具有活性的異源二聚體并隨后介導IL-12通路信號的產(chǎn)生。

吞噬細胞和樹突狀細胞受到細菌和微生物刺激后會分泌產(chǎn)生IL-12，伴隨抗原呈遞，IL-12誘導CD4+T細胞分化為產(chǎn)生IFN-γ的輔助性T細胞1（Th1）以及誘導淋巴因子激活的殺傷細胞和NK細胞。這些Th1細胞對細胞內(nèi)病原體微生物（如嗜肺軍團菌、結(jié)核分枝桿菌、單核細胞增生李斯特菌和沙門氏菌屬等）產(chǎn)生反應和促進滯發(fā)性超敏反應和巨噬細胞活化。

NK、B和T細胞是主要的表達IL-12受體的細胞，IL-12介導的信號通過將酪氨酸激酶TYK2和JAK2分別招募到IL-12Rβ1以及IL-12Rβ2來啟動信號傳遞，隨后這些激酶會進一步磷酸化并激活下游的轉(zhuǎn)錄因子STAT4， 隨后STAT4復合物轉(zhuǎn)移到細胞核，與Jun癌基因（c-Jun）一起，與IFN-γ啟動子結(jié)合，導致IFN-γ轉(zhuǎn)錄和Th1分化。此外，IL-12相關(guān)的IFN-γ產(chǎn)生會進一步誘導趨化因子CXCL10的產(chǎn)生，進而抗血管生成。

IL-12與免疫類疾病的相關(guān)性及藥物開發(fā)

在體內(nèi)中，IL-12和IL-23由組織中的樹突狀細胞和巨噬細胞等“預警細胞"生成。在IL-12和IL-27的共同作用下CD4+ 輔助T細胞（Th）會分化為表達干擾素γ（IFNγ）的Th1細胞。而IL-23會與其它細胞因子共同作用，促使CD4+ Th細胞分化為Th17細胞，同時刺激Th17細胞分泌IL-17家族細胞因子，這些因子具有促炎癥的作用。

急性炎癥反應是身體對抗外來病原體入侵所產(chǎn)生的反應，然而當體內(nèi)炎癥相關(guān)細胞因子的水平失衡時，會引發(fā)炎癥持續(xù)發(fā)生，導致風濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸?。↖BD，通常包括克羅恩病和潰瘍性腸炎）、脊柱關(guān)節(jié)炎（SpA）和銀屑病等慢性免疫類疾病。由于IL-12、IL-23/IL-17信號通路在釋放促炎癥細胞因子方面的重要作用，這一信號通路也成為開發(fā)治療慢性炎癥疾病的熱門靶標，催生了多款重磅藥物和在研療法。

由強生開發(fā)的Ustekinumab是一款針對IL-12和IL-23的抗體拮抗劑，它可以特異性的結(jié)合白細胞介素IL-12和IL-23的p40蛋白亞單位，通過同時抑制IL-12和IL-23相關(guān)信號通路來達到治療慢性炎癥相關(guān)的免疫類疾病。該藥自上市以來，已獲批中重度斑塊狀銀屑病、活動性銀屑病關(guān)節(jié)炎、中重度活動性克羅恩病以及中重度活動性潰瘍性結(jié)腸炎等多個相關(guān)適應癥。在國內(nèi)，康方生物自主開發(fā)的抗IL-12/IL-23單克隆抗體注射液AK101 也屬于同類產(chǎn)品，該藥物目前處于臨床實驗階段，開展了針對中重度斑塊狀銀屑病、中重度潰瘍性結(jié)腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡適應癥等多個臨床研究。

IL-12與腫瘤免疫的相關(guān)性及藥物開發(fā)

多項研究表明，IL-12可以通過多種免疫調(diào)節(jié)機制發(fā)揮抗腫瘤的作用，其作用機制主要有：

1）通過調(diào)節(jié)T細胞介導細胞免疫發(fā)揮抗腫瘤作用；

2）通過誘生IFN-γ介導抗腫瘤效應；

3）通過抑制血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用。已有的數(shù)據(jù)表明修飾過的IL-12或人工合成的IL-12激動劑與PD-1&PD-L1, CTLA4等免疫檢查點抑制劑聯(lián)用可產(chǎn)生協(xié)同效應，增強藥物的抗腫瘤作用。以IL-12為靶點，開發(fā)腫瘤免疫相關(guān)療法的多項臨床研究也正在進行中。（如下表所示）

針對IL-12藥物的研發(fā)，科佰生物開發(fā)了相關(guān)細胞篩選模型，可用于細胞水平篩選IL-12激動劑或拮抗劑活性。

部分產(chǎn)品數(shù)據(jù)

IL12 Effector Reporter cell CBP74134

Figure 1. Dose Response of Recombinant Human IL12 in Human IL12 Effector Reporter Cells (C2).

Figure 2. Inhibition of IL12-induced Reporter Activity by IL-12/IL -23 p40 Neutralizing Antibody in IL12 Effector Reporter Cells (Clone2).